重组人骨形成蛋白-2在大肠杆菌中的表达、纯化和复性

• 作者: 孙奋勇 孙晋华 戴云 汪炬 洪岸 邱垂源
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨形态发生蛋白质类 大肠杆菌 人类
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1480-1485
• 页数: 6页
• 分类号: R363
• 字数: 1384字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2005.08.006

摘要

目的:通过对大肠杆菌表达重组人骨形成蛋白-2的复性研究,得到高活性的重组人骨形成蛋白-2.方法:在大肠杆菌中通过温度诱导表达重组人骨形成蛋白-2经过Triton X-100清洗之后,又通过DEAE离子交换层析纯化包涵体,包涵体在8 mol/L尿素变性溶解,在氧化-还原(还原型和氧化型谷胱甘肽)复性系统中,通过简单的稀释复性,通过肝素亲和层析一步纯化法纯化重组人骨形成蛋白-2,最后通过诱导C2C12细胞产生碱性磷酸酶检测重组人骨形成蛋白-2活性.结果:温度诱导表达重组人骨形成蛋白-2是以包涵体单体的形式存在,经过几步纯化后,得到高纯度的包涵体.重组人骨形成蛋白-2在不同氧化-还原剂比例,和不同小分子化学辅助剂浓度中复性,得到复性的效率也不同.亲和层析纯化后,本实验得到重组人骨形成蛋白-2的生物学活性比商业化的重组人骨形成蛋白-2更高.结论:重组人骨形成蛋白-2属于转化因子-β家族,此复性方法可能应用于此家族的其他成员同时得到成本低、产量高的重组人骨形成蛋白-2,可能为临床应用创造了良好的条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙晋华	暨南大学生物工程研究所	3	20	2.0	3.0
2	洪岸	暨南大学生物工程研究所	107	856	14.0	25.0
3	孙奋勇	暨南大学生物工程研究所	67	545	11.0	20.0
4	戴云	暨南大学生物工程研究所	31	155	8.0	11.0
5	汪炬	暨南大学生物工程研究所	39	289	11.0	16.0
6	邱垂源	暨南大学生物工程研究所	5	56	5.0	5.0