重组人胶原蛋白肽在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 吴铭 孙旸 王刚 陈光
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组胶原蛋白肽 重组蛋白纯化 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 656-660
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:构建含有胶原蛋白基因的原核表达载体pET32a-CP6,并转入大肠杆菌BL21 (DE3)中进行高效表达,为获得大量可溶的胶原蛋白肽提供可靠依据.方法:将重组表达载体pET32a-CP6转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG为诱导剂,对温度、接种量、诱导时机、IPTG诱导浓度等各种发酵参数进行优化,筛选高效表达的发酵条件,并通过Ni-NTA亲和层析进行纯化分析.结果:菌株在37℃、接种量为2%、摇瓶培养约2.5h后,加入终浓度为0.5mmol· L-1的IPTG,37℃诱导5h,收获的蛋白产量最高为31.52 mg· L-1,Western blotting分析该表达产物与人COL6A2单克隆抗体有特异结合能力.结论:优化工程菌高效表达重组人胶原蛋白,纯化重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈光	吉林农业大学生命科学院生物物理实验室	175	1299	19.0	26.0
2	吴铭	吉林农业大学生命科学院生物物理实验室	12	43	3.0	6.0
3	王刚	吉林农业大学生命科学院生物物理实验室	47	314	9.0	16.0
4	孙旸	吉林农业大学生命科学院生物物理实验室	52	349	11.0	16.0