重组人乙酰肝素酶在大肠杆菌中的表达、纯化

• 作者: 冉菘余 宫锋 崔真源 李素波 檀英霞 王璇琳 田曙光 高红伟
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 乙酰肝素酶 大肠杆菌 表达优化 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 434-437
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33
• 字数: 4027字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2009.05.010

摘要

目的:表达纯化重组的人乙酰肝素酶 (heparanase,HPA).方法:以表达乙酰肝素酶全长质粒pcDNA3.1-HPA为模板,扩增不包括信号肽的乙酰肝素酶片段,将其插入pET-28a(+)载体,转化到大肠杆菌BL21(plysS,DE3)中,在起始诱导菌密度、诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度4个方面对诱导条件进行了优化,实现了重组人乙酰肝素酶的可溶性表达.采用HisTrapTMcrude亲和层析对目的蛋白进行了初步纯化.结果:得到了初步纯化的HPA蛋白,Western 印迹证实表达产物可被乙酰肝素酶抗体和His标签抗体识别,证明表达产物具有乙酰肝素酶的免疫学特性.结论:表达纯化的人HPA蛋白为特异性单抗的制备和鉴定提供了实验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宫锋	军事医学科学院野战输血研究所	47	194	7.0	11.0
2	李素波	军事医学科学院野战输血研究所	54	223	7.0	11.0
3	高红伟	军事医学科学院野战输血研究所	35	72	4.0	6.0
4	檀英霞	军事医学科学院野战输血研究所	31	157	6.0	11.0
5	王璇琳	军事医学科学院野战输血研究所	15	49	4.0	6.0
6	田曙光	军事医学科学院野战输血研究所	19	54	4.0	6.0
7	崔真源	军事医学科学院野战输血研究所	2	5	2.0	2.0
8	冉菘余	军事医学科学院野战输血研究所	1	3	1.0	1.0