重组人胰激肽原酶在大肠杆菌中的表达

• 作者: 侯乐锋 卢嘉宝 陈劲春
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 人胰激肽原酶 表达
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 146-149
• 分类号: Q78
• 字数: 3639字
• 语种: 中文

摘要

根据人胰激肽原酶的氨基酸序列,采用大肠杆菌偏爱密码子,设计合成目的基因片段约750 bp.将设计得到的片段连接到pET-22b(+)表达载体中并测序,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达.将IPTG诱导表达的菌体进行SDS-PAGE电泳,在相对分子质量24 kD处可明显观察到高表达带,主要以包涵体形式存在,质量分数可达21.6％,进一步测得蛋白活性为2.27 nmol/s.利用MALDI串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS/MS)鉴定蛋白,蛋白得分106,大于可信得分83(P ＜0.05),确定了蛋白一级结构的正确性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈劲春	北京化工大学生命科学与技术学院	53	248	9.0	13.0
2	卢嘉宝	北京化工大学生命科学与技术学院	5	4	1.0	2.0
3	侯乐锋	北京化工大学生命科学与技术学院	1	3	1.0	1.0