携带大片段BIBAC克隆在不同农杆菌中的遗传稳定性研究

• 作者: 张朝良 曹孟良 曹筑荣 李强 李磊 杨剑 杲修杰 梁铃 邢俊杰
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 大片段基因文库 根癌农杆菌 遗传稳定性
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 291-294
• 页数: 4页
• 分类号: Q75
• 字数: 2311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2006.04.002

摘要

大片段克隆在农杆菌中的稳定性是利用可转化大片段载体进行农杆菌介导遗传转化的关键问题.选用插入片段分子质量分别为150 kb和50 kb的BIBAC克隆,测定了在3种农杆菌AGL-1,EHA105和LBA4404中的遗传稳定性.从第1、3、5次继代培养的农杆菌中抽提的质粒及酶切结果显示,由于农杆菌背景质粒的干扰,难以判断质粒的降解与否.将农杆菌质粒再转化到大肠杆菌宿主中,发现来自农杆菌AGL-1和EHA105的质粒出现了明显的降解,片段变小,而来自农杆菌LBA4404的质粒没有变化.结果表明,大片段BIBAC质粒在不同农杆菌菌株中的稳定性不同,在农杆菌LBA4404中比较稳定,适合用于遗传转化.