嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶活性片段的表达和对小鼠的免疫试验

• 作者: 任燕 姚火春 陆承平
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 温敏胞外蛋白酶 融合表达 相对保护率
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 875-878
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 3040字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2006.06.010

摘要

为确定嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)J-1株温敏胞外蛋白酶EprJ1的表达产物是否具有酶活性和抗原性及测定对小鼠的相对保护率,根据eprJ1基因ORF阅读框的序列设计1对引物,扩增出不含信号肽序列的EprJ1成熟蛋白结构基因(850bp),经EcoRⅠ/SalⅠ双酶切后连接pET-32a(+),转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21.在30℃经IPTG诱导后,重组菌冻融液在脱脂奶平板上经28℃和24 h孵育检测有透明溶蛋白圈出现,经56℃和30 min处理后则无.纯化的重组蛋白免疫哌小鼠后,用1.0× 107cfu的Ah J-1(50LD50)腹腔注射攻击小鼠,重组蛋白对小鼠的相对保护率可达60%.免疫印迹显示,Ah J-1胞外产物的抗血清可以识别该融合蛋白,但AhJ-1的热稳定胞外蛋白酶ECPase54抗血清不能识别该融合蛋白.重组蛋白分子量约53.2 kD,有温敏蛋白酶活性和抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚火春	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室	90	614	11.0	23.0
2	陆承平	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室	387	5495	37.0	51.0
3	任燕	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室	5	73	4.0	5.0