实时荧光PCR法检测DPYD*9等位基因的单核苷酸突变

• 作者: 刘晓晴 林莉 王升启 邹德勇 陈苏红
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: DPYD*9 单核苷酸多态性 实时PCR 基因分型
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 233-235,291
• 页数: 4页
• 分类号: R373.72
• 字数: 2781字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.03.009

摘要

目的:建立一种简便、特异的对二氢嘧啶脱氢酶基因DPYD*9进行等位基因分型的方法.方法:以DPYD基因为靶合成含突变位点的野生型引物WF、突变型引物TF和共同的下游引物R,用DNA荧光嵌入染料SYBR Green Ⅰ进行荧光PCR扩增,对产物进行溶解曲线分析以确定基因型;同时优化了引物浓度,分析其灵敏度并与普通PCR进行了比较,对20份PCR产物进行了验证.结果与结论:以野生型基因组为模板时,WF和R组合有荧光响应,而TF和R组合无荧光响应;当以突变型基因组为模板时,TF和R组合有荧光响应,而WF和R组合无荧光响应.两者Ct 值均为24,Tm值均为83oC.优化引物浓度为0.25 μmol/L,荧光PCR可分出10个模板拷贝数的基因型,而普通PCR只能区分模板为8.0×102拷贝数的基因型.PCR产物测序证实荧光PCR法与直接测序结果一致.该方法能准确快速地区分DPYD*9的基因型,敏感性和特异性强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王升启	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	315	3297	28.0	41.0
2	陈苏红	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	44	306	9.0	15.0
3	刘晓晴		55	363	11.0	17.0
4	林莉		24	242	9.0	15.0
5	邹德勇	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	1	1	1.0	1.0