利用核糖体展示技术筛选功能性蛋白质方法的建立

• 作者: 周建忠 崔凯军 廖建 李炯 魏于全
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 核糖体展示 体外筛选 功能性蛋白 锚蛋白 红血球膜带3蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 28-33
• 页数: 6页
• 分类号: Q781
• 字数: 4669字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2006.01.006

摘要

核糖体展示(ribosome display)是一种体外筛选功能性蛋白质的有力的工具.利用体外转录和翻译偶联系统可以方便而快捷地完成核糖体展示.筛选系统利用一对能够紧密结合的蛋白质:人锚蛋白(ankyrin)和红血球膜带3蛋白细胞质区域(cytoplasmic domain of erythrocyte membrane protein Band 3,Cdb3)作为模式分子,希望利用cdb3蛋白通过核糖体展示亲和选择得到锚蛋白基因.用于核糖体展示的人锚蛋白基因结构由组装PCR构建,通过PCR技术引入核糖体展示所需的结构元件.在亲和筛选步骤后,只能利用红血球膜带3蛋白筛选得到锚蛋白基因,而不能利用对照牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)筛选得到,从而说明建立的核糖体展示技术能够正常发挥作用.