Bcl-xl/LipofectamineTM2000比值对人角膜基质细胞转染效率的影响

• 作者: 朱雪菲 李新宇 李贵刚
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: Bcl-xl 角膜基质细胞 基因转染 阳离子脂质体
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 524-526
• 页数: 3页
• 分类号: R772
• 字数: 2911字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-5141.2006.07.013

摘要

目的检测Bcl-xl/LipofectamineTM2000复合物中两者比值对转染人角膜基质细胞转染效率的影响,探讨其用于人角膜基质细胞基因转染的最佳比值.方法选择Bcl-xl/LipofectamineTM2000比值1:2、1:4、1:8、1:10四个实验组制备载体复合物转染人角膜基质细胞,转染时间24 h.在转染后3 d,采用半定量RT-PCR检测目的基因Bcl-x1 mRNA表达的变化;采用免疫组织化学染色法及流式细胞计数法检测目的基因Bcl-x1表达阳性细胞率.数据采用SPSS软件分析.结果Bcl-xl/LipofectamineTM2000载体复合物中两者比值能显著影响其对人角膜基质细胞的转染效率,存在最佳的比值.当Bcl-xl/LipofectamineTM2000比值为1:8时,培养的人角膜基质细胞获得了最佳的转染效率.转染后3 d,定量PCR显示1:8组mRNA表达水平高于其他组(P＜0.05),Bcl-x1免疫组化染色及流式细胞计数法均显示1:8组转染效率最高,阳性细胞率为(45.6±2.0)%(免疫组织化学染色法),(48.3±3.0)%(流式细胞计数法)(P＜0.05).结论LipofectamineTM 2000能有效介导外源基因Bcl-xl转染人角膜基质细胞.Bcl-xl/LipofectamineTM2000载体复合物比值为1:8时转染效率最高.