腺病毒介导脑源性神经营养因子基因在培养的雪旺细胞中的表达

• 作者: 卢春光 惠延年 胡丹
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 视神经损伤 脑源性神经营养因子 雪旺细胞 重组腺病毒 感染 基因转染
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 361-364
• 页数: 4页
• 分类号: R77
• 字数: 4053字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5123.2006.02.025

摘要

目的:观察腺病毒介导人脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因在培养的雪旺细胞(Schwann cell, SC)中的表达,为视神经损伤修复提供可靠的组织工程用的种子细胞.方法:在293细胞中培养扩增BDNF重组腺病毒(adenovirall delivered BDNF,Ad-BDNF),采用蚀斑形成试验测定其感染滴度.体外培养SD大鼠源性的SC,以Ad-BDNF感染培养的SC,用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerse chain reaction,RT-PCR)检测BDNF mRNA的表达,用免疫印迹技术(immunoblot assay,Western Blotting)和酶联免疫反应检测(enzyma-linked immumosorbent assay,ELISA)培养液上清中BDNF的表达.结果:Ad-BDNF经扩增后可获得较高感染滴度的重组腺病毒载体.在正常培养条件下未经Ad-BDNF感染的SC低表达BDNF,而感染3d后的SC其BDNF表达明显升高,表达量随时间延长而增加,并能在感染21d后仍维持高表达趋势.结论:Ad-BDNF可以介导BDNF基因转染到培养的SC中,后者可以在较长时间内高效表达BDNF.