侵染上海番茄的黄瓜花叶病毒及其卫星RNA的32P分子标记杂交检测及分子鉴定

• 作者: 廖乾生 张华荣 张姮 朱为明 杜志游 郭江峰 陈燕飞 陈绍宁 陈集双
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番茄 病毒病 黄瓜花叶病毒 卫星RNA 上海
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 同位素示踪·动物生理·植物生理
• 页码范围: 433-437
• 页数: 5页
• 分类号: S4
• 字数: 3829字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8551.2006.05.021

摘要

2004和2005年夏季,在上海郊区露天栽培的番茄地出现典型的病毒病危害,并造成严重的产量损失.分别以32P标记的CMV基因组RNA3部分序列和卫星RNA的cDNA探针对自然感病的番茄叶组织和提纯的病毒粒子中提取的总RNA进行杂交检测,确定以上植物组织和病毒粒子中均具有CMV及卫星RNA.d8RNA分析确定自然感病叶组织中具有典型黄瓜花叶病毒(CMV)基因及其卫星RNA条带.以常规引物对感病植物的总RNA进行RT-PCR扩增,获得CMV RNA3全长克隆,经测序显示该RNA3序列属于CMV亚组Ⅱ;通过在卫星dsRNA两端分别加上15nt的单链DNA接头,以接头互补序列为引物进行扩增获得一个383nt的卫星RNA的全长序列.同源性分析结果显示其与已报道的CMV卫星RNA同源性为72.6%～99.5%,但其3′末端存在多个碱基的突变.根据同位素杂交检测及分子鉴定,CMV及其卫星RNA变异类型在上海自然感病番茄上发生和普遍存在,可能对病害流行和新的症状出现产生影响.