HPV16+治疗性无佐剂蛋白疫苗——HPV16z-Hsp65-E6/E7的构建、表达及纯化工艺研究

• 作者: 刘朝阳 刘毅 张伟 曹冬艳 李艳芬 李茉 梁智 王小兵 田海梅 程冬婉 邵长君
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒16型 治疗性疫苗 宫颈癌
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 40-44
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3145字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2006.12.008

摘要

目的:研制针对我国宫颈癌高危相关的HPV16型的治疗性无佐剂蛋白疫苗.方法:应用PCR技术自我国山西宫颈癌高发现场分离到的毒株--HPV16z中获得E6/E7转化基因片段,自卡介苗菌株中克隆获得Hsp65基因片段,对E6/E7基因片段定点突变修饰,构建pET28a-Hsp65-E6/E7表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达融合蛋白,并研究重组蛋白的纯化方案和工艺.结果:成功构建pET28a-Hsp65-E6/E7重组表达载体,E6/E7突变位点正确,融合蛋白在亲和层析柱上正确复性和初步纯化,经阴离子交换色谱纯化后蛋白纯度达到95%.结论:该研究为无佐剂治疗性重组蛋白疫苗Hsp65-E6/E7的进一步功能研究奠定了基础.