碱性果胶酯裂解酶工程菌的构建

• 作者: 堵国成 沈微 诸葛斌 陈坚
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 工学
• 关键词: 碱性果胶酯裂解酶 基因 表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 547-549
• 页数: 3页
• 分类号: TQ92
• 字数: 2841字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1006-687X.2006.04.023

摘要

从本研究室筛选的Bacillus subtilis WSHB04-02菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL,将其插入大肠杆菌分泌表达载体pET22b(+)多克隆位点,得到重组载体pET22b(+)PL. 序列分析表明,所获PL基因与已报道的B. subtilis SO113的PL基因的同源性为98%.重组载体在大肠杆菌BL21 (DE3)中得到表达. SDS-PAGE分析显示,表达产物的分子量(Mr)均为43×103,同核酸序列测定所推导的值相符.该工程菌经IPTG诱导后,胞内酶活为8 U/mL. 研究发现,碱性果胶酯裂解酶不仅在胞内有酶活,胞外也有酶活,说明所构建的表达体系可使该酶向胞外分泌. 图3 表1 参6