新型靶向性非病毒载体K16GRGDSPC转染骨髓基质细胞的条件优化

• 作者: 刘勇 宋玉林 李长文 潘海涛 郑启新 郭晓东
• 来源期刊: 华中科技大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 靶向性非病毒载体 含RGD肽 转染 优化
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 369-372,376
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4260字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2006.03.025

摘要

目的优化新型靶向性非病毒基因载体--含RGD肽K16GRGDSPC介导转化生长因子β1(TGF-β1)基因转染骨髓基质细胞的转染条件.方法固相合成法合成K16GRGDSPC寡肽并用质谱仪和高压液相色谱仪进行检测.在保持其它因素一致的条件下,通过变化单一因子来筛选某个最佳参数.结果合成肽与设计肽的分子量一致,纯度为94%～95%,满足实验要求.在寡肽载体介导转染的过程中,溶酶体抑制剂氯喹起着不可或缺的作用,而且在氯喹溶液中的暴露时间至少应维持在8 h以上;在载体/DNA复合物中暴露时间过短(＜4 h)或过长(＞24 h)对转染都有不利影响;血清对载体/DNA复合物与细胞的结合有明显抑制作用;质粒含量在2～4μg时转染效果最佳;质粒/载体质量比为1:2～1:4时有较高的转染效率;加入转铁蛋白也能显著提高基因的转染和表达,且在25μg时转染效率达到最大.结论通过优化转染条件可提高寡肽载体的转染效率,可为下一步进行骨基质材料表面基因修饰研究提供基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑启新	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	247	1718	19.0	26.0
2	刘勇	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	158	1356	20.0	28.0
3	郭晓东	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	131	935	16.0	23.0
4	宋玉林	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	23	103	6.0	9.0
5	潘海涛	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	24	92	5.0	8.0
6	李长文	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	8	46	3.0	6.0