人胰岛素基因在家蝇幼虫中的表达

• 作者: 刘维全 夏平安 崔保安 张红英
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 家蝇 卵黄蛋白基因 启动子 克隆 人胰岛素
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医学
• 页码范围: 386-390
• 页数: 5页
• 分类号: S969.453.1|Q785
• 字数: 3581字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2340.2006.04.012

摘要

构建了家蝇基因组文库,通过噬菌斑原位杂交技术从家蝇基因组文库中筛选出mdYP1克隆,并从mdYP1克隆中分离到含约1.7 kb 5'-上游区的家蝇卵黄蛋白-1基因组基因序列.PCR扩增出大小不同的4个启动子片段,分别插入到切除了CMV启动子的pCMV-GFP质粒中的绿色荧光蛋白报告基因上游,构建pMYP1-GFP,pMYP2-GFP,pMYP3-GFP和pMYP4-GFP 4个重组质粒,经电转移试验和荧光检测表明,P2(+684/+7),P3(+1165/+7)和P4(+1616/+7)3个启动子片段具有转录活性.将P2,P3分别插入到切除了CMV启动子的pCMV-ImINS重组质粒中的人胰岛素基因上游,构建pMYP2-ImINS和pMYP3-ImINS重组质粒,电转移新鲜家蝇卵,放射免疫分析法检测人胰岛素在蝇蛆中的表达水平.pMYP2-ImINS和pMYP3-ImINS组的人胰岛素表达量分别为29.6,22.1mU·L-1;阳性对照组为13.2 mU·L-1;阴性对照组为8.8 mU·L-1.结果说明P2启动子片段活性最强,同时又证明了内源性启动子能提高外源基因的表达效率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔保安	河南农业大学牧医工程学院	274	2313	25.0	33.0
2	夏平安	河南农业大学牧医工程学院	65	271	9.0	14.0
3	张红英	河南农业大学牧医工程学院	125	1140	19.0	29.0
4	刘维全	中国农业大学生物学院	22	98	6.0	9.0