柔嫩艾美球虫杂交株F2 SO7基因重组鸡痘病毒的构建和筛选

• 作者: 尹继刚 张西臣 李建华 杨桂连 赵权
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 柔嫩艾美球虫 SO7 重组 鸡痘病毒
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 356-359
• 页数: 4页
• 分类号: R383.24
• 字数: 2988字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7423.2006.05.009

摘要

目的 构建柔嫩艾美球虫(E.tenella)杂交株F2 SO7基因重组鸡痘病毒.方法 将柔嫩艾美球虫杂交株F2 SO7基因,插入到以胸苷激酶(TK)基因为侧翼的鸡痘病毒表达载体pUTA2中的复合启动子下游,获得重组表达质粒pUTA-SO7.用脂质体将重组表达质粒转染鸡痘病毒(FPV)感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),培养、收获病毒后,用含40 mg/L5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)的培养液,在TK基因阳性CEF细胞中筛选培养2代,然后用不含BrdU的培养液进行病毒噬斑纯化以筛选rFPV.结果 PCR扩增可见650 bp左右蛋白条带,间接荧光抗体试验(IFAT)可见重组病毒感染细胞表面有绿色荧光物质,蛋白质印迹分析(Western Blotting),在相对分子质量(Mr)36000处有1条特异条带,证实了重组病毒在CEF中表达了SO7基因.结论 成功筛选出表达E.tenella杂交株F2 SO7基因的重组鸡痘病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵权	吉林农业大学动物科学技术学院	125	322	9.0	12.0
2	杨桂连	吉林大学畜牧兽医学院	99	415	11.0	14.0
4	张西臣	吉林大学畜牧兽医学院	211	623	11.0	18.0
5	李建华	吉林大学畜牧兽医学院	302	1731	21.0	33.0
6	尹继刚	吉林大学畜牧兽医学院	51	322	9.0	16.0