柔嫩艾美球虫扬州株SO7抗原基因表达条件的研究

• 作者: 彭金彪 王留 许金俊 陶建平
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 柔嫩艾美球虫 重组SO7抗原 大肠杆菌 表达条件
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 54-60
• 页数: 7页
• 分类号: S8
• 字数: 6591字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.01.014

摘要

通过RT-PCR扩增柔嫩艾美球虫YZ株折光体SO7抗原基因,并进行克隆和测序.将不含信号肽编码区片段的SO7基因克隆入表达载体pGEX-6p-1谷胱甘肽-S-转移酶基因的下游,构建表达质粒pGEX-6p-1-SO7,转化宿主菌BL21,获得重组菌.通过建立生长曲线,对诱导条件的摸索,根据SDS-PAGE确定融合蛋白的最佳表达条件.通过融合蛋白切胶免疫小鼠制备超免疫血清,经间接ELISA检测其与Etenella子孢子抗原反应的特异性.结果显示,诱导时机和诱导时间是影响表达的主要因素,诱导温度、IPTG浓度次之;诱导时机以3 h为最佳,诱导时间以4.5 h为最佳;诱导温度以37℃最佳,0.008～1.000 mmo1/L的IPTG对表达量的影响不大.在优化的表达条件下,表达产物主要以包涵体存在,表达量占菌体总蛋白的37.5%.间接ELISA结果表明融合蛋白具有一定的免疫原性,保留了天然蛋白的部分抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶建平	扬州大学兽医学院	112	455	11.0	15.0
2	许金俊	扬州大学兽医学院	72	401	12.0	16.0
3	王留	扬州大学兽医学院	9	26	3.0	4.0
4	彭金彪	扬州大学兽医学院	12	89	5.0	9.0