小鼠STAT3基因干扰质粒的构建及其效果鉴定

• 作者: 丁震宇 星懿展 李泽桂 李红丽 李铁石
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: pBS/U6/STAT3-siRNA STAT3 RNAi 小鼠
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1022-1025
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|Q782|Q785
• 字数: 3271字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.10.008

摘要

目的构建小鼠STAT3基因的特异性RNA干扰质粒,并鉴定其在细胞水平的抑制效果.方法采用DNA载体介导的RNA干扰技术构建小鼠STAT3基因的特异性RNAi质粒(pBS/U6/STAT3-siRNA),并通过RT-PCR、免疫印迹、免疫细胞化学染色等技术对pBS/U6/STAT3-siRNA的抑制效率进行鉴定.结果经双酶切鉴定筛选出4个阳性干扰质粒,分别转入293T细胞后均可明显降低STAT3的表达,尤以靶向(+2 334～+2 351)位点的质粒干扰效率最高,达70%.结论小鼠STAT3基因的特异性干扰质粒(pBS/U6/STAT3-siRNA)能从蛋白及mRNA水平上特异和高效地抑制STAT3基因的表达.这种DNA载体介导的双链RNA干扰质粒为进一步探究STAT3与胚胎发育的相关功能提供一种有效的研究工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李铁石	清华大学生命科学与医学研究院基因组研究所	2	12	1.0	2.0