噬菌体改组库的构建及高活性水蛭素变异体的筛选

• 作者: 刘家云 刘莉 王宗仁 龙铟
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 水蛭素 DNA改组 亲和淘选
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 167-170
• 页数: 4页
• 分类号: Q81
• 字数: 4484字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2006.02.011

摘要

目的: 运用DNA家族改组方法提高水蛭素的抗凝血酶活性.方法: 将水蛭素HV1、 HV2、 HV3基因等量混合, 用DNase I消化, 回收50 bp左右的片段, 再经无引物和有引物PCR扩增获得与原基因大小相同的改组分子, 构建噬菌体展示的水蛭素改组文库, 经凝血酶亲和淘选, ELISA筛选高活性的水蛭素变异体.结果: 经过DNA改组和噬菌体亲和筛选, 成功获得抗凝血酶活性提高的水蛭素变异体HV2-N47K.结论: 用DNA家族改组及亲和淘选技术能够筛选出高活性的水蛭素变异体蛋白, 这为其他分子的改组提供了借鉴.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宗仁	第四军医大学西京医院中医科	117	1103	19.0	25.0
2	龙铟	第四军医大学西京医院中医科	34	303	11.0	16.0
3	刘家云	第四军医大学西京医院检验科	117	731	14.0	20.0
4	刘莉	第四军医大学药学系药理学教研室	61	676	13.0	24.0