牦牛β-干扰素基因的克隆与表达

• 作者: 景志忠 李玉萍 窦永喜 蒲训 陈国华
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: β-干扰素 牦牛 基因克隆 同源性 分子进化树 表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 40-45
• 页数: 6页
• 分类号: S859.797|Q786
• 字数: 5311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2006.01.011

摘要

提取经植物血凝素(PHA)诱导培养的牦牛外周血淋巴细胞总RNA,采用RT-PCR技术扩增并克隆了牦牛IFN-β基因,经PCR和酶切鉴定及测序分析,再克隆到pGEX-4T-1质粒载体中,构建了原核表达重组载体,经IPTG诱导表达重组蛋白,可表达约41 ku的牦牛IFN-β融合蛋白,主要以包涵体形式存在.序列分析结果表明,牦牛IFN-β基因ORF为498 bp,与乳牛IFN-β参考序列的同源性高达98.6%,与猪、马、猫、人IFN-β基因的同源性分别为72.5%、68.9%、66.1%和63.5%,而与狗、鼠、鸡等动物的同源性均不超过25%;分子遗传进化树分析也表明,牦牛与乳牛IFN-β基因的亲缘关系最近,而与鼠、狗、鸡等的亲缘关系较远,说明IFN-β基因有种属差异性.