人胎盘组织造血干/祖细胞的分离富集

• 作者: 刘祖林 刘金伟 方宁 祁莹 章涛 陈代雄
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD34抗原 造血干细胞 胎盘 免疫磁珠细胞分选 脐血
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 干/祖细胞生物学
• 页码范围: 955-958
• 页数: 4页
• 分类号: R321.4|R331.1
• 字数: 2667字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2006.05.022

摘要

为了探索从胎盘组织中分离富集造血干/祖细胞(HSPC)的标化流程,采用机械法加胶原酶消化法制备人胎盘组织单个细胞悬液,用羟乙基淀粉(6%HES)法从中分离出单个核细胞(MNC),再经免疫磁珠分选法分选出CD34-、CD34+CD38-、CD34+CD38+3个细胞亚群,用流式细胞术对各阶段分选细胞进行表型分析并计算分选细胞的富集度和回收率.结果表明:机械法加胶原酶消化法制备的人胎盘组织单个细胞悬液中单个核细胞(MNC)数达(12.30±3.51)×108,与脐血初始样品所含的MNC数(8.86±5.38)×108比较差异无统计学意义,而其CD34+细胞所占百分率[(3.93±2.31)%]则明显高于脐血[(0.44±0.29)%].胎盘组织单个细胞悬液经6%HES分离后MNC和CD34+细胞的回收率分别为(45.3±11.7)%和(51.1±9.8)%;MNC经免疫磁珠分选后,其CD34+细胞的纯度和回收率分别为(73.4±14.1)%和(52.7±11.7)%.结论:本实验所建立的"机械法加胶原酶消化法-HES分离MNC-MACS分选目标细胞"的分离纯化方法可从胎盘组织获得高丰度、高富集度、高活性的HSPC,为进一步研究胎盘HSPC提供了比较经济、效果较好的分离富集方案.