利用宏基因组文库筛选草甘膦不敏感的5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS)基因

• 作者: 孟秀萍 林敏 梁爱敏 穆文超 金丹 陆伟 顿宝庆
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 化学
• 关键词: 宏基因组 5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS) 草甘膦
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 1284-1288
• 页数: 5页
• 分类号: O6
• 字数: 3067字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2006.12.015

摘要

为探索利用宏基因组文库筛选草甘膦不敏感的5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶(EPSPS)基因,直接从土壤中提取细菌DNA,构建草甘膦污染土壤细菌宏基因组文库,并利用EPSP合酶缺失突变株ER2799筛选到4个能互补EPSP合酶功能的克隆,其中两个克隆的转化子能够在含5mmol/L草甘膦的MOPS培养基上生长.测序结果表明它们均含有完整的EPSP合酶编码基因,GT-1aroA核苷酸长度为1335bp,编码445个氨基酸,GT-4aroA核苷酸长度为1350bp,编码450个氨基酸.利用PCR方法将两个基因克隆到原核表达载体pET28a上后,可以使宿主细胞BL21(DE3)在含100mmol/L草甘膦的MOPS培养基中良好生长.上述结果表明,利用宏基因组文库筛选方法可以得到高抗草甘膦的EPSPS基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林敏	中国农业科学院生物技术研究所	68	905	15.0	28.0
2	陆伟	中国农业科学院生物技术研究所	34	448	12.0	20.0
3	金丹	中国农业科学院生物技术研究所	5	60	4.0	5.0
4	顿宝庆	中国农业科学院生物技术研究所	4	34	2.0	4.0
5	梁爱敏	中国农业科学院生物技术研究所	2	15	2.0	2.0
6	孟秀萍	中国农业科学院生物技术研究所	1	6	1.0	1.0
7	穆文超	中国农业科学院生物技术研究所	1	6	1.0	1.0