重组病毒rAAV2-PD-L1的构建及其转染小鼠血管内皮细胞的生物学效应

• 作者: 康晓燕 李瑾 殷正丰 王孟龙 董刚 钱海华
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: PD-L1 腺相关病毒 内皮细胞 T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1186-1189
• 页数: 4页
• 分类号: Q784
• 字数: 2860字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2006.11.008

摘要

目的:构建腺相关病毒rAAV2介导的PD-L1表达系统,检测感染rAAV2-PD-L1的血管内皮细胞共刺激T细胞分泌细胞因子的作用.方法:以鼠肝脏组织来源的总RNA为模板,应用RT-PCR扩增PD-L1 cDNA,克隆入穿梭质粒pSNAV1,脂质体法转染包装细胞BHK21,筛选获得重组病毒rAAV2-PD-L1.以rAAV2-PD-L1感染小鼠血管内皮细胞株2F-2B后,与活化的小鼠T 细胞共培养,ELISA法检测培养上清IFNγ浓度.结果:测序结果表明,克隆的小鼠PD-L1 cDNA和重组质粒pSNAV-PD-L1序列正确.重组病毒rAAV2-PD-L1经PCR扩增出目的基因片段,在SDS-PAGE电泳上显示AAV2三条特征带,纯度大于98%.病毒物理滴度为4×1012 virus genome/ml;蛋白浓度为0.355 mg/ml.感染rAAV2-PD-L1的血管内皮细胞高表达PD-L1.活化T细胞与其共培养后,培养上清IFNγ浓度显著降低.结论:构建的重组病毒rAAV2-PD-L1可感染血管内皮细胞,并且共刺激可抑制活化T细胞分泌IFNγ.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱海华	第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室	18	135	8.0	11.0
2	康晓燕	第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室	18	104	6.0	9.0
3	殷正丰	第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室	66	456	12.0	18.0
4	李瑾	第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室	14	132	5.0	11.0
5	董刚	第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室	2	2	1.0	1.0
6	王孟龙	南方医科大学南方医院肝胆外科	2	0	0.0	0.0