重组多肽酶联免疫吸附法检测抗Scl-70抗体的初步应用

• 作者: 唐福林 姚志建 汪国生 陈竹
• 来源期刊: 中华内科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组 表位 抗Scl-70抗体 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 926-929
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 字数: 3842字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0578-1426.2006.11.014

摘要

目的 制备人Scl-70抗原207～765位氨基酸片段融合蛋白作为自身抗原,探讨ELISA检测抗Scl-70抗体的敏感性和特异性.方法 构建编码Scl-70抗原第207至第765位氨基酸片段的重组体,在宿主菌E.coliBL21(DE3)中表达融合蛋白,经Ni2+-NTA亲和层析纯化后,免疫印迹法鉴定抗原性,ELISA检测北京协和医院免疫科血清库中系统性硬化(SSc)及部分其他结缔组织病患者血清抗Scl-70抗体.结果 重组融合蛋白在宿主菌中获得可溶性表达,免疫印迹法鉴定表明其能与标准抗Scl-70抗体阳性血清反应,而与正常血清,其他抗血清无反应.在36份SSc患者血清中,天然抗原免疫双扩散(DID)法共检出的6份阳性血清用重组多肽ELISA检测有5份呈阳性,30份经天然抗原DID法检测为阴性的血清用重组多肽ELISA检测有3份呈阳性;20份其他结缔组织病患者血清用重组多肽ELISA检测均为阴性.结论 重组的207～765位氨基酸片段是Scl-70抗原的主要抗原表位区域,以重组多肽为基质ELISA检测抗Scl-70抗体的敏感性较高,为进一步研究抗体水平与临床病情变化的相关性奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚志建		7	30	3.0	5.0