人前列腺干细胞抗原在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

• 作者: 孙颖浩 王林辉 许传亮 顾正勤 高旭
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺 干细胞 抗原 基因表达 免疫血清
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 344-346
• 页数: 3页
• 分类号: R737.25
• 字数: 2341字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2006.03.030

摘要

目的:克隆并在大肠杆菌中表达人前列腺干细胞抗原(PSCA)基因,制备其抗血清.方法:通过PCR方法扩增包含蛋白融合点的PSCA基因片段,经DNA测序证实后克隆至带有Trx.6His标签的原核表达载体pET32a,重组质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达结果,经Ni-NTA树脂亲和纯化的蛋白皮下注射免疫小鼠,ELISA检测抗血清的滴度,免疫组化鉴定其特异性.结果:PCR扩增得到241 bp的目的片段,序列测定证实与GenBank上登录的序列一致;成功构建了PSCA基因片段的原核表达载体pET32a-PSCA;在大肠杆菌中表达,于相对分子质量为20.4×103处有一蛋白新生带;PSCA融合蛋白免疫小鼠后,ELISA确认抗血清的滴度>1∶4 000.抗血清检测到前列腺癌组织中PSCA的表达. 结论:成功克隆、表达了人PSCA融合基因片段,并制备了相应的抗血清.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许传亮	第二军医大学长海医院泌尿外科	154	1565	16.0	34.0
2	高旭	第二军医大学长海医院泌尿外科	79	1061	13.0	31.0
3	王林辉	第二军医大学长海医院泌尿外科	181	1588	16.0	34.0
4	孙颖浩	第二军医大学长海医院泌尿外科	387	3365	22.0	44.0
5	顾正勤	第二军医大学长海医院泌尿外科	9	37	4.0	6.0