抗人有机阴离子转运蛋白3抗体制备及其在肾脏定位的研究

• 作者: 何娅妮 吴镝 张萍 杨聚荣 许国双 陈香美
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肾脏 有机阴离子转运蛋白3 基因免疫 抗体制备
• 年，卷（期）: 2006,（23）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 2333-2335
• 页数: 3页
• 分类号: R322.61|R392.11|R394-33
• 字数: 3252字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.23.011

摘要

目的 采用新的基因免疫方法制备小鼠抗人有机阴离子转运蛋白3(anti-human organicanion transporter 3,hOAT3)多克隆抗体,并用该抗体对hOAT3在人肾小管上皮细胞的表达进行定位研究.方法 应用Accelrys软件分析hOAT3抗原表位,选择其细胞内表位,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法从人肾组织RNA中扩增其261 bp的cDNA序列,克隆到pBQAP-TT构建基因免疫载体,与辅助载体pCMVi-GMCSF和pCMVi-FIT3L同时免疫小鼠,5周后获得血清抗体,人肾组织Western blot和免疫组化鉴定抗体的特异性和定位表达.结果 成功构建基因免疫载体pBQAP-TT-hOAT3,序列分析鉴定正确,ELISA方法测得抗体滴度高达1∶3 000,该抗体识别人肾皮质膜蛋白62×103的hOAT3,人肾组织免疫组化提示该抗体识别定位在肾小管上皮细胞基底膜.结论 成功用基因免疫方法制备高效特异性抗hOAT3多克隆抗体,为今后的生理病理研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张萍	第三军医大学大坪医院野战外科研究所肾内科	98	506	12.0	15.0
2	杨聚荣	第三军医大学大坪医院野战外科研究所肾内科	36	244	9.0	14.0