水仙单染色体特异文库的构建

• 作者: 吕柳新 吴菁华
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 水仙 微分离 单染色体 微克隆
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 305-308
• 页数: 4页
• 分类号: Q785|Q247
• 字数: 3066字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4025.2006.02.014

摘要

采用玻璃针分离法,通过显微操作系统成功地分离到一个多花水仙(Narcissus tazetta L.,2n=22)品种的中着丝粒单染色体,将分离到的单染色体放入0.2 mL Eppendorf管中,经去蛋白、、Sau、3A酶切,并在染色体DNA片段两端加上、Sau、3A人工接头后,进行两轮PCR扩增,得到0.3～3.0 kb之间的DNA片段.用水仙基因组DNA标记作探针,与扩增产物进行Southern杂交,从而证明单染色体DNA确实已被成功地扩增.将第二轮PCR产物构建质粒文库,随机挑取90个重组子进行分析,发现插入片段主要在600～2 500 bp之间.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴菁华	福建农林大学园艺学院	29	393	10.0	19.0
2	吕柳新	福建农林大学园艺学院	89	1859	25.0	36.0