肝细胞癌患者组织中MAGE-1基因的原核表达及鉴定

• 作者: 张建平 徐凛峰 朱进 焦永军
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人肝细胞癌(HCC) MAGE-1 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 普外科专题研究
• 页码范围: 534-537
• 页数: 4页
• 分类号: R511.1|Q34
• 字数: 2959字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2006.07.016

摘要

目的:克隆MAGE-1基因并对其进行原核表达及鉴定.方法:通过逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)从原发性肝癌的细胞中扩增MAGE-1基因片段,将该片段克隆在原核表达载体PET-32a中,重组克隆转化大肠杆菌BL21(DE3),表达的蛋白以His亲和柱层析纯化,并用Dot-blot和Westem-blot对其进行鉴定.结果:经RT-PCR扩增出930 bp基因片段,经测序分析后的DNA序列与Genbank中的报道序列同源程度达98%,构建含重组表达载体PET32-M1的工程菌,经IPTG诱导表达、纯化,MAGE-1蛋白浓度为0.48 mg/ml,经Dot-blot和Western-blot检测,纯化蛋白可以与商业化的驴抗MAGE-1的多抗结合.结论:成功扩增了肝细胞肝癌中的MAGE-1基因全长cDNA并对其进行了原核表达与鉴定,为进一步研究MAGE-1基因的功能和研制有临床价值的全人抗MAGE-1抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张建平	南京医科大学第二附属医院普外科	62	376	10.0	16.0
2	徐凛峰	南京医科大学第二附属医院普外科	10	90	5.0	9.0
3	朱进	南京医科大学医学分子生物学研究所	34	82	4.0	7.0
4	焦永军	南京医科大学医学分子生物学研究所	5	23	4.0	4.0