重组原核表达载体pGEX-4T-1-MAGE-1的构建及表达

• 作者: 何炜 张朝 章茜 赵国强
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: MAGE-1 pGEX-4T-1 表达载体 原核表达 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 491-494
• 页数: 4页
• 分类号: R730.3
• 字数: 2256字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2006.03.035

摘要

目的:构建人肿瘤相关抗原MAGE-1基因原核表达载体.方法:从人肝细胞性肝癌组织中提取总RNA,RT-PCR扩增出MAGE-1基因.酶切鉴定后,将其插入pGEM-T载体,再克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-MAGE-1.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导4 h,SDS-PAGE及凝胶密度扫描分析目的蛋白的表达情况.结果:RT-PCR扩增出长度为927 bp的MAGE-1基因.重组表达质粒pGEX-4T-1-MAGE-1转化大肠杆菌BL21(DE3)后经诱导表达,目的蛋白约57 000,占菌体总蛋白的23%.结论:成功构建出重组原核表达载体pGEX-4T-1-MAGE-1,该载体在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国强	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	245	807	11.0	16.0
2	何炜	郑州大学基础医学院生理学教研室	56	282	8.0	14.0
3	章茜	郑州大学基础医学院生理学教研室	55	186	8.0	10.0
4	张朝	郑州大学基础医学院生理学教研室	17	29	3.0	4.0