MAGE-3原核重组表达载体的构建和表达

• 作者: 杨红梅 裴瑞 赵利萍 赵国强 陈洁
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 逆转录-聚合酶链反应 黑色素瘤抗原-3 克隆表达 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 405-408
• 页数: 4页
• 分类号: Q781
• 字数: 3219字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2007.06.004

摘要

目的 构建原核重组表达载体pGEX-4T-1-MAGE-3并检测其在大肠杆菌(E.coli)BL21中的表达.方法 RT-PCR法制备MAGE-3目的基因,采用DNA重组技术将其克隆至pGEM-T Easy和亚克隆至pGEX-4T-1载体,转化E.coli BL21株,经IPTG诱导,12%SDS-PAGE电泳分离和Western Blot表达鉴定.结果 扩增出349bp的MAGE-3目的基因并构建了原核重组表达载体pGEX-4T-1- MAGE-3;测序结果与GenBank收录序列相一致;在E.coli BL21中检测到含该重组表达载体的转化菌表达出分子量约35kD的融合蛋白并证实其为目的蛋白.结论 成功构建的原核重组表达载体pGEX-4T-1- MAGE-3及其所表达的融合蛋白,为以MAGE-3为基础的肽疫苗及特异诊断试剂的研制提供抗原打下了基础,为后续实验提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国强	郑州大学医学院微生物与免疫学教研室	245	807	11.0	16.0
2	陈洁	河南职工医学院病理生理学教研室	36	205	8.0	13.0
3	杨红梅	河南职工医学院病理生理学教研室	44	269	9.0	13.0