MAGE-3基因片段真核表达质粒的构建

• 作者: 杨红梅 杨萍 裴瑞 赵国强 陈晓玲 陈洁
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MAGE-3 克隆 RT-PCR 重组质粒 肿瘤免疫治疗
• 年，卷（期）: 2005,（23）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3576-3579,3582
• 页数: 5页
• 分类号: R730.3
• 字数: 3047字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2005.23.015

摘要

目的克隆人MAGE-3基因片段,以构建真核重组表达质粒pcDNA3.1-MAGE-3,为制备以MAGE-3基因片段为基础的核酸疫苗及探讨相关的肿瘤免疫治疗提供实验依据.方法RT-PCR法从肝癌组织制备出含BamHI、EcoRI酶切位点的MAGE-3基因片段,pGEM-T Easy为克隆载体,pcDNA3.1为真核表达载体,采用DNA重组技术,将目的基因先克隆至pGEM-T Easy载体再亚克隆至pcDNA3.1载体上,然后,据氨苄青酶素(Amp)抗性、蓝白筛选实验、克隆鉴定引物T7/SP6PCR扩增方法鉴定阳性克隆,并对阳性克隆pcDNA3.1-MAGE-3中的插入序列进行DNA测序.结果扩增出了MAGE-3目的基因片段;经蓝白筛选实验、克隆鉴定引物扩增方法鉴定得到重组子pGEM-T-MAGE-3;引物扩增方法鉴定得到重组子pcD-NA3.1-MAGE-3;DNA测序后与GenBank中MAGE-3相应序列比较,结果完全一致.结论成功构建了重组pcDNA3.1-MAGE-3肿瘤核酸疫苗,为肿瘤免疫治疗提供了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国强	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	245	807	11.0	16.0
2	陈洁	河南职工医学院病理生理学教研室	36	205	8.0	13.0
3	杨红梅	河南职工医学院病理生理学教研室	44	269	9.0	13.0
4	裴瑞	河南职工医学院实验中心	30	202	8.0	13.0
5	陈晓玲	河南职工医学院实验中心	31	163	7.0	12.0
6	杨萍	河南职工医学院实验中心	9	72	4.0	8.0