差速贴壁法纯化分离GFP转基因小鼠骨髓间充质干细胞

• 作者: 周鸿鹰 李甫强 梅妍 王廷华 羊惠君 胡火珍 项涛
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 差速贴壁法 分离纯化 骨髓间充质干细胞 GFP转基因小鼠
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 301-304
• 页数: 4页
• 分类号: R331.2
• 字数: 3677字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2006.02.036

摘要

目的运用差速贴壁法分离纯化绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs).方法分离GFP转基因小鼠骨髓细胞直接种植在培养瓶中,分别于2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h、14 h、16 h、24 h和48 h进行首次全量换液,培养3 d后按细胞类型对贴壁细胞分别计数,并用CD44、CD45、CD54进行免疫细胞化学染色.另外,选4 h、8 h、24 h后换液的细胞进行传代培养,传至第5代,计算扩增倍数,用CD44、CD45、CD54进行免疫细胞化学染色.结果随着首次换液时间的延长,贴壁细胞密度增多,BMSCs的比例减少.首次换液时间在接种后2 h的细胞纯度高,但细胞密度低;24 h后的细胞密度高而纯度低;8 h后的细胞密度大具有较高的纯度.传代后的GFP转基因小鼠BMSCs能稳定表达GFP.结论差速贴壁法能有效分离纯化GFP转基因小鼠BMSCs,首次换液时间在接种后8～10 h时的传代细胞纯度高,具有扩增能力,可作为组织工程和基因治疗研究的种子细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	项涛	四川大学华西基础医学与法医学院解剖学教研室	30	189	7.0	12.0
2	周鸿鹰	四川大学华西基础医学与法医学院解剖学教研室	22	133	7.0	10.0
3	羊惠君	四川大学华西基础医学与法医学院解剖学教研室	44	321	9.0	16.0
4	李甫强	四川大学华西基础医学与法医学院解剖学教研室	7	37	3.0	6.0
5	梅妍	四川大学华西基础医学与法医学院解剖学教研室	12	75	5.0	8.0