含RGD肽基因导入系统介导TGFβ1基因转染骨髓基质干细胞的瞬时表达与稳定表达

• 作者: 刘勇 李长文 潘海涛 郑启新 郭晓东
• 来源期刊: 中国骨与关节损伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 含RGD肽 TGFβ1基因 转染 骨髓基质干细胞
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 717-719
• 页数: 3页
• 分类号: R68
• 字数: 3084字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-9935.2006.09.013

摘要

目的 评价含RGD肽基因导入系统K16GRGDSPC(简记作K16-RGD)作为新型基因转染载体的可行性,并探讨转化生长因子β1(TGFβ1)基因转染骨髓基质干细胞(BMSCs)的表达能力.方法 固相合成法合成K16-RGD.以6μg K16-RGD:2μgpcDNA3-TGFβ1(pTGFβ1)比例转染第三代兔BMSCs,转染72 h后通过免疫组织化学染色和图像分析检测TGFβ1的瞬时表达水平;G418筛选2周形成阳性克隆,扩大培养后同法检测TGF-β1的稳定表达水平.通过酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测TGF-β1的表达分析转染的量效关系和时效关系.结果 瞬时转染组免疫组化部分细胞呈强阳性,稳定转染组几乎全部细胞呈强阳性并且持续表达4周以上.图像分析显示瞬时转染组和稳定转染组TGF-β1的表达均比对照组显著增强(P＜0.01),且稳定表达组明显高于瞬时表达组(P＜0.05).ELISA法检测量效关系显示,转染体系中K16-RGD(μg):pTGFβ1(μg)为3:1时TGFβ1有最高的表达效率;时效关系显示,稳定转染组TGFβ1的表达比瞬时表达组高(P＜0.05).结论 含RGD肽基因导入系统K16-RGD作为基因转染载体是可行的,TGFβ1基因转染BMSCs可有效表达TGFβ1,为下一步利用K16-RGD作为载体构建载TGFβ1基因骨基质材料进行骨缺损修复研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑启新	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	247	1718	19.0	26.0
2	刘勇	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	158	1356	20.0	28.0
3	郭晓东	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	131	935	16.0	23.0
4	潘海涛	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	24	92	5.0	8.0
5	李长文	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	8	46	3.0	6.0