应用RT-PCR构建人表皮生长因子基因真核表达质粒

• 作者: 周建大 夏昆 罗成群 谢慧清 陈勇 陈道谨
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 表皮生长因子 逆转录聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 189-191
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2006.02.019

摘要

目的体外克隆及构建带信号肽的人表皮生长因子(hEGF)基因真核表达质粒.方法设计人表皮生长因子(hEGF)基因和信号肽基因引物,采用RT-PCR技术从胎肾组织总RNA中扩增出hEGF基因和信号肽基因序列,克隆入pGEM-T载体,酶切鉴定和序列分析后经T4连接酶连接并克隆入表达质粒pcDNA3.1(+),再次酶切鉴定和序列分析.结果RT-PCR扩增产物电泳获得约90 bp和180 bp条带,与hEGF及其信号肽cDNA大小符合;克隆入T载体后经序列分析与hEGF及信号肽基因一致,克隆入pcDNA3.1(+)质粒后双酶切获得约230 bp和5.4kb条带,再次测序与hEGF cDNA一致.结论成功构建带信号肽的hEGF基因的真核表达质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈勇	中南大学医学遗传学国家重点实验室	74	422	10.0	17.0
2	夏昆	中南大学医学遗传学国家重点实验室	73	372	10.0	14.0
3	罗成群	中南大学湘雅三医院烧伤整形科	101	556	11.0	18.0
4	周建大	中南大学湘雅三医院烧伤整形科	82	453	10.0	17.0
5	谢慧清	中南大学湘雅三医院康复医学科	16	110	6.0	9.0
6	陈道谨	中南大学湘雅三医院烧伤整形科	3	6	2.0	2.0