TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测外周血CK19 mRNA

• 作者: 张军 李闻捷 毕建威 经纬 魏国
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: CK19 实时荧光定量PCR TaqMan 胃肿瘤
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 315-317
• 页数: 3页
• 分类号: R735.2
• 字数: 3289字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2006.03.020

摘要

目的:应用TaqMan实时荧光定量RT-PCR技术,建立定量检测CK19 mRNA的方法. 方法:采用RT-PCR从胃癌细胞中克隆CK19片段(230 bp),装入pMD 18-T Simple载体.纯化质粒,制备荧光定量PCR标准品.应用LightCycle荧光定量PCR仪检测标准品、30例正常人外周血和5例肿瘤组织CK19 mRNA. 结果:PCR扩增及测序均证实CK19 cDNA片段重组到pMD 18-T载体上,建立了稳定的检测CK19 mRNA的标准,即设定CT值在35个循环之内,检测结果低于100个拷贝数量级为阴性标本.结论:采用TaqMan实时荧光定量RT-PCR技术检测外周血CK19 mRNA是一种稳定可靠的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张军	第二军医大学长海医院中心实验室	89	490	11.0	17.0
2	李闻捷	第二军医大学长海医院中心实验室	71	494	12.0	18.0
3	毕建威	第二军医大学长海医院普通外科	98	653	12.0	21.0
4	魏国	第二军医大学长海医院普通外科	26	239	9.0	15.0
5	经纬	第二军医大学长海医院普通外科	14	88	4.0	9.0