L02细胞在2-乙酰氨基芴处理大鼠肝中的增殖

• 作者: 刘国栋 李俊刚 林沪 毛青 王宇明 蒋业贵 蒋黎 邓国宏
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 嵌合肝 L02肝细胞 动物模型 移植 大鼠
• 年，卷（期）: 2006,（23）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2281-2287
• 页数: 7页
• 分类号: R3
• 字数: 6549字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2006.23.005

摘要

目的:应用2-乙酰氨基芴(2-acetaminofluorene,2-AAF),研究L02细胞移植到具有正常免疫性的大鼠肝内的存活与增殖情况.方法:SD大鼠出生前宫内ip正常人L02肝细胞,诱导胎鼠对L02肝细胞产生免疫耐受,出生2 wk时分别ip小(1.2 mg/kg)、中(13 mg/kg)、大剂量(30 mg/kg)2-乙酰氨基芴或生理盐水,隔日行2/3肝切除术,同时经脾移植DiI染色后的人L02肝细胞,建立2-AAF/PH肝细胞增殖模型.采用免疫荧光、RT-PCR、免疫组化、DiI荧光示踪等方法,在不同时相分别检测人白蛋白、人白蛋白mRNA、增殖细胞核抗原(PCNA)以及在荧光显微镜下观察人L02肝细胞在鼠肝内的分布,并采用计算机图像分析系统分析不同时相PCNA阳性细胞的数密度和面积密度.结果:2-乙酰氨基芴实验组(小、中、大剂量)的各项检测,均与对照组无明显区别;于移植后1,2,4,6,8,10 wk在荧光显微镜下观察到人L02肝细胞在鼠肝内的动态分布;移植后2,4,6,8 wk大鼠均检测出人白蛋白及人白蛋白mRNA;移植后2,4,6 wk检测出特异性人增殖细胞核抗原PCNA,移植后1,2,4,6,8 wk检测出非特异性PCNA.结论:2-AAF/PH模型中,2-乙酰氨基芴对移植L02细胞无明显增殖作用;L02细胞在2-乙酰氨基芴处理人鼠嵌合肝动物模型中存活10 wk,产生白蛋白功能持续8 wk.