Prx Ⅱ基因敲降L02细胞系的构建及其对细胞增殖的影响

• 作者: 孔令祖 满艺 甄兴 申贵男 金美华 韩英浩
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: L02细胞系 Prx Ⅱ 细胞增殖 RNA干扰技术 慢病毒
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 49-55
• 页数: 7页
• 分类号: R285
• 字数: 4998字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2019.01.009

摘要

构建Prx Ⅱ基因敲降L02细胞系并确定Prx Ⅱ基因对L02细胞增殖的影响.利用慢病毒介导的shRNA干扰技术、流式细胞术、荧光显微照相、蛋白质免疫印迹、MTT asssay等方法建立并检验Prx Ⅱ敲降L02细胞系及其对L02细胞的增殖影响.结果 显示:选用5'-CCGCTTGTCTGAGGATACGTT-3'片段作为干扰Prx Ⅱ基因片段,利用慢病毒敲降L02细胞.同时处理嘌呤霉素筛选得到shPrx Ⅱ组细胞和Scramble组细胞,使用流式细胞术、荧光显微照相技术对shPrx Ⅱ组细胞和Scramble组细胞进行检测,结果均显示出GFP蛋白表达;此后利用蛋白质免疫印迹法检测出shPrx Ⅱ组细胞中Prx Ⅱ蛋白表达水平较Blank、Scramble组显著降低(P＜0.05),Blank组与Scramble组细胞中Prx Ⅱ蛋白表达水平无明显差异.在MTT结果中显示shPrx Ⅱ组细胞增殖速率明显高于Scramble组,且具有统计学意义.成功构建Prx Ⅱ敲降的L02细胞系,发现Prx Ⅱ敲降后显著提高L02细胞的增殖速率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩英浩	黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院	31	47	3.0	6.0
2	金美华	黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院	13	5	2.0	2.0
3	申贵男	黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院	24	39	3.0	5.0
4	满艺	黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院	2	0	0.0	0.0
5	甄兴	黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院	3	4	2.0	2.0
6	孔令祖	黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院	3	12	2.0	3.0