人巨细胞病毒UL123基因外显子2,3诱饵质粒的构建与鉴定

• 作者: 文兰 罗敏华 邬国军 陈利玉 马琼山
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 巨细胞病毒 外显子 质粒 克隆,分子
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1310-1312
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2227字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2006.10.006

摘要

目的 构建和鉴定人巨细胞病毒(HCMV)UL123基因外显子2,3(ie1-exon2,3)的诱饵质粒,并评价其用于筛选胎儿脑文库的可行性.方法 以重组质粒pTWIN1/ie1为模板扩增ie1-exon2,3,克隆入pBT质粒,转化E.coli XL1-Blue MRF'Kan,经PCR、限制性酶切和测序鉴定阳性重组子,提取阳性重组质粒转化入细菌双杂交系统报告菌株,诱导表达重组融合蛋白,用SDS-PAGE和Western Blot对表达产物进行鉴定,并进一步鉴定重组子自身激活作用.结果 在细菌双杂交系统中成功构建了细菌双杂交诱饵质粒pBT/ie1-exon2,3,并在报告菌株中表达了重组融合蛋白rIE1-N85/λC1,且pBT/ie1-exon2,3无自身激活作用.结论 成功构建了无自激活作用的诱饵质粒pBT/ie1- exon2,3,可用于筛选胎儿脑文库.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬国军	中南大学基础医学院医学微生物学系	35	196	9.0	12.0
2	陈利玉	中南大学基础医学院医学微生物学系	51	270	9.0	14.0
3	罗敏华	中南大学基础医学院医学微生物学系	22	124	6.0	10.0
4	马琼山	中南大学基础医学院医学微生物学系	8	24	3.0	4.0
5	文兰	中南大学基础医学院医学微生物学系	8	3	1.0	1.0