人巨细胞病毒UL82基因重组质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 李磊 李黔生 毛敬伟
• 来源期刊: 西南国防医药
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 UL82基因 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 358-360
• 页数: 3页
• 分类号: R511
• 字数: 2175字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0188.2004.04.005

摘要

目的:用基因工程技术克隆人巨细胞病毒pp71蛋白基因,构建高效表达pp71蛋白的工程菌.方法:在传代培养的人包皮成纤维细胞中接种人巨细胞病毒(HCMV),待绝大多数的细胞出现了细胞病变效应后,用冻融法收获细胞,用PCR技术扩增目的基因,将基因片段插入表达载体pGEX-4T-1内,转化大肠杆菌DH5α,TPTG诱导其表达.结果:获得的工程菌所表达的pp71蛋白大小约为71000,约占菌体总蛋白的30.0%.结论:成功的构建了oGEX/pp71重组表达质粒,并在DH5α中高效表达出pp71蛋白,为下一步pp71蛋白的大量表达和纯化奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李黔生	第三军医大学大坪医院野战外科研究所肾移植科	87	413	10.0	15.0
2	李磊	第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室	49	286	8.0	14.0
3	毛敬伟	第三军医大学大坪医院野战外科研究所肾移植科	4	7	1.0	2.0