乙肝病毒X基因真核表达质粒及细胞模型的建立

• 作者: 刘国珍 刘洪波 吴传湘 李涛 谭德明
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 医学
• 关键词: HBV X蛋白 真核表达 乙型肝炎病毒 细胞模型
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 355-360
• 页数: 6页
• 分类号: R575.3
• 字数: 4651字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2007.04.015

摘要

采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增HBV X基因,定向亚克隆入真核表达载体pRc/CMV2,构建重组质粒pCMV/X;采用脂质体法转染QSG7701细胞,筛选阳性细胞克隆;RT-PCR法检测HBV X mRNA的表达情况,Western blotting法鉴定HBx蛋白的表达.结果表明,构建的真核重组表达质粒pCMV/X中包含有完整的HBV X基因片断,pCMV/X转染的QSG7701细胞中有HBV X mRNA及HBx蛋白的稳定表达.成功建立了HBV X稳定转染的细胞系,为进一步探讨HBx在HCC的发生发展过程中所起的作用,提供了一个有价值的细胞模型.