乙肝病毒HBx基因荧光真核表达质粒的构建与鉴定

• 作者: 梁安民 连芳 邬国斌
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: HBx基因 质粒 绿荧光蛋白 肝癌细胞
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 357-360
• 分类号: R735.7
• 字数: 3343字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2010.03.010

摘要

目的:克隆乙肝病毒HBx基因及构建增强型绿色荧光蛋白-HBx基因(pEGFP-N1-HBx)荧光真核表达质粒并进行表达鉴定.方法:以CH-HEP-1肝癌细胞株基因组DNA为模板PCR法扩增HBx基因,PCR产物测序分析正确后克隆至真核表达载体pEGFP-N1,命名为pEGFP-N1-HBx.将该质粒转染肝细胞株HepG2以RT-PCR及荧光显微镜检测其表达情况.结果:酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含HBx基因,RT-PCR检测和荧光显微镜观察表明构建的pEGFP-N1-HBx在肝癌细胞株HepG2真核细胞中表达,且其绿色荧光蛋白瞬时表达率为20%～30%.结论:HBx基因克隆及其真核表达载体pEGFP-N1-HBx构建成功,可用于肝癌发生发展的生物学研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	连芳	广西医科大学生理学教研室	19	64	5.0	7.0
2	梁安民	广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科	72	352	9.0	16.0
3	邬国斌	广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科	26	76	5.0	7.0