犬瘟热病毒RT-nested PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 吴威 张海玲 柴秀丽 王凤雪 程世鹏 罗国良 邵西群 闫喜军
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 犬瘟热病毒 反转录巢式PCR 反转录PCR NP基因
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 955-959
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5|Q503
• 字数: 3569字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.11.010

摘要

根据犬瘟热病毒(CDV)弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计了套式引物,建立了RT-nested PCR检测方法.特异性试验表明,该法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、犬副流感病毒(CPIV)、犬冠状病毒(CCV),DNA病毒犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)及正常Vero细胞中均不能扩增出条带.敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增到10-9稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者.用RT-nested PCR法检测了2006年我国东北地区临床表现犬瘟热症状的病例19例,检出率达90%,明显高于RT-PCR的检出率(45%).部分病例扩增片段的测序结果表明,CDV NP基因出现个别碱基变异.研究结果表明,建立的犬瘟热病毒RT-nested PCR方法敏感、特异,适用于动物犬瘟热的快速诊断.