DARPP - 32基因对SH-SY5Y细胞药物敏感性的调节作用

• 作者: 刘丽华 张宏卫 李伟
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经母细胞瘤 基因,DARPP-32 RNA干扰 SH-SY5Y细胞
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 977-981
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 3901字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.05.033

摘要

目的:探讨DARPP-32基因对人神经母细胞瘤细胞药物敏感性的调节作用.方法:构建DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体,并将它们转导入人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotting进行鉴定;MTT法检测细胞转染前后药物敏感性的变化;流式细胞仪检测细胞转染前后对阿霉素的蓄积浓度的变化;RT-PCR和Western blotting检测细胞转染前后耐药相关蛋白P-gp、MRP和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达变化.结果:成功构建了DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体;筛选到稳定的DARPP-32高/低表达的神经母细胞瘤细胞模型;MTT试验和流式细胞仪检测结果显示,上调DARPP-32的表达能够显著增强神经母细胞瘤细胞对长春新碱、阿霉素、5-氟尿嘧啶和顺铂的敏感性,提高细胞内阿霉素的蓄积(P＜0.05),转染DARPP-32小干扰RNA后的细胞对化疗药物的敏感性降低,细胞内的阿霉素蓄积量显著减少(P＜0.05);RT-PCR和Western blotting结果显示,DARPP-32能够下调P-gp和Bcl-2的表达.结论:DARPP-32基因能够调节神经母细胞瘤细胞对化疗药物的敏感性,具有较好的临床应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李伟	四川大学华西医院神经科	239	1303	18.0	26.0
2	张宏卫	绍兴文理学院医学院附属医院神经科	31	153	7.0	11.0
3	刘丽华	绍兴文理学院医学院分子诊断实验室	17	85	5.0	8.0