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摘要:
目的:筛选可以与螺旋-环-螺旋(HLH)结构域缺失的Id2相互作用的蛋白.方法:用重叠延伸PCR方法将Id2中的HLH结构域缺失,并插入到pGBKT7载体,构建 BD∶ Id2-DBM-δHLH融合诱饵质粒;构建MCF-7细胞的ds cDNA文库;采用共转化方法进行Id2-DBM-δHLH相互作用蛋白的酵母双杂交筛选,采用PCR方法扩增阳性克隆中的AD∶ cDNA序列并测序;将获得的AD∶ cDNA质粒分别与BD∶ Id2-DBM-δHLH诱饵质粒共转化酵母进行配对验证.结果:酵母双杂交方法共筛选到19个阳性克隆,PCR方法在这19个克隆中共扩增到28条片段,序列测定证实含18个不同的基因,对其中的13个进行配对验证后证实了其中8个与HLH缺失型Id2相互作用,这8个基因分别是:UXT、VIM、KRT7、FHL2、SEI1、PCBP1、SIVA和LSM2.结论:本研究首次利用HLH缺失型Id2作为诱饵,利用酵母双杂交技术筛选识别了一族新的Id2相互作用蛋白,为进一步研究Id2的功能调控以及非HLH依赖的功能活性奠定基础.
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文献信息
篇名 HLH缺失型Id2候选相互作用蛋白
来源期刊 军事医学科学院院刊 学科 生物学
关键词 Id2 螺旋-环-螺旋构型 酵母菌 双杂交系统技术 蛋白相互作用
年,卷(期) 2007,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 317-321
页数 5页 分类号 Q753
字数 4688字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-9960.2007.04.005
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 赵亚力 解放军总医院分子生物室 93 443 10.0 17.0
2 孟元光 解放军总医院妇产科 133 638 12.0 19.0
3 韩为东 解放军总医院分子生物室 113 744 13.0 23.0
4 伍志强 解放军总医院分子生物室 47 114 6.0 9.0
5 司艺玲 解放军总医院分子生物室 37 134 7.0 9.0
6 杨洁 解放军总医院分子生物室 90 466 11.0 18.0
7 田丽媛 解放军总医院分子生物室 17 50 5.0 6.0
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研究主题发展历程
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Id2
螺旋-环-螺旋构型
酵母菌
双杂交系统技术
蛋白相互作用
研究起点
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
军事医学
月刊
1674-9960
11-5950/R
大16开
北京太平路27号
82-757
1956
chi
出版文献量(篇)
4313
总下载数(次)
13
总被引数(次)
15987
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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