人前列腺特异性膜抗原基因启动子/增强子表达载体的构建及组织特异性鉴定

• 作者: 吴伟芳 孔峰 崔福爱 康鲁东 王秀利 胡晓燕
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺肿瘤 前列腺特异抗原
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 120-123
• 页数: 4页
• 分类号: R737.25
• 字数: 3028字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.01.027

摘要

目的:构建前列腺特异性表达的人前列腺特异膜抗原(PSMA)基因启动子/增强子表达载体,并进行组织特异性鉴定.方法:从人外周血中提取基因组DNA,采用PCR技术分别扩增PSMA上游1 175 bp的启动子序列,及第三内含子中258 bp的增强子序列,将两个序列定向克隆至荧光素酶报告基因表达质粒pGL3-Basic,构建前列腺特异性表达载体pGL3-PSMP-PSME.将构建载体用脂质体分别转染前列腺癌PC-3M细胞株及4种非前列腺癌细胞株,48 h后通过检测荧光素酶表达活性,确定克隆的启动子及增强子的活性及其组织特异性表达活性.结果:构建的pGL3-PSMP-PSME质粒经酶切及DNA测序分析鉴定,证实克隆片段的大小、插入方向及其序列正确.细胞转染结果显示,pGL3-PSMP-PSME在PC-3M细胞株中表达活性明显高于其它4种非前列腺癌细胞株.结论:构建的前列腺表达载体具有较高的组织特异性,为进一步研究PSMA调控序列驱动治疗基因进行前列腺癌的靶向生物治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔峰	山东大学医学院生化与分子生物学研究所	38	129	5.0	9.0
2	胡晓燕	山东大学医学院生化与分子生物学研究所	48	205	7.0	12.0
3	康鲁东	山东大学医学院生化与分子生物学研究所	8	27	4.0	4.0
4	王秀利	郑州大学一附院骨科	22	88	6.0	8.0
5	崔福爱	山东大学医学院生化与分子生物学研究所	9	67	5.0	8.0
6	吴伟芳	山东大学医学院生化与分子生物学研究所	15	28	4.0	4.0