H3、H5、H7、H9亚型流感病毒通用多表位核酸疫苗构建及表达研究

• 作者: 刘成宏 南文龙 沈国顺 田明尧 贾雷立 金宁一 陈义锋 陈晓月 马海利 马鸣潇 鲁会军
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 表位 流感病毒 核酸疫苗
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 疫菌学
• 页码范围: 1136-1138
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2261字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-5101.2007.12.019

摘要

目的 构建表达A型流感病毒多种表位的核酸疫苗,并研究其在幼仓鼠肾细胞(BHK细胞)内表达产物的生物学活性.方法 筛选流感病毒主要抗原(HA、NA、NP、M)表位基因,以生物信息学软件优化其排列结构,合成流感通用的复合多表位基因(Epi),以H5、H7亚型流感病毒HA融合表达基因为骨架,将多表位基因Epi插入构建H7HA-Epi-H5HA阅读盒,定向克隆至pVAX1,构建抗A型流感H3579亚型的pVAX1-H7HA-Epi-H5HA.最后将该重组质粒转染BHK细胞,提取细胞总RNA,以RT-PCR方法检测目的基因;以间接免疫荧光试验(IFA)初步测其表达产物抗原性.结果 RT-PCR检测到目的基因;IFA检测到特异性荧光存在.结论 本试验所构建的重组质粒pVAX1-H7HA-EpiH5HA,在真核细胞内均获了有效地转录和表达;而且其表达产物均能与相应的抗体特异性结合,证明了其具有一定的生物学活性和抗原性,有望成为抗多种A型流感病毒的通用核酸疫苗.