盐胁迫下胡杨cDNA文库的构建及其nhx基因的克隆

• 作者: 张富春 朱馨蕾 马艳
• 来源期刊: 植物研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 胡杨 盐胁迫 cDNA文库 nhx
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 页码范围: 82-88
• 页数: 7页
• 分类号: Q94
• 字数: 4166字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5102.2007.01.016

摘要

采用CTAB法提取经600 mmol·L-1 NaCl胁迫处理后的胡杨总RNA,利用SMART技术构建载体为λTriplEx2的盐胁迫条件下胡杨的表达型cDNA文库(SSL).文库的滴度为1.2×106 pfu·ml-1,重组率约为90.6%,扩增后的滴度为3×109 pfu·ml-1,容量约为2.4×1011.插入片段长度均大于400 bp,平均长度约为790 bp.从文库中随机挑选32个阳性克隆进行3′端测序,并将测序结果通过NCBI (National Center for Biotechnology Information) 数据库进行比较,发现有23个EST序列与已知序列有明显的同源性,而其余的与NCBI中的已知序列相似性较低(e值＞10-4),可能是未知基因.其中序列SSL061、SSL179与脱水素序列有较高的序列一致性.同时合成引物,通过PCR扩增文库的方法,从中筛选获得存在于植物细胞膜上并在植物受盐胁迫时起重要作用的nhx基因,进一步验证了文库的质量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张富春	新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室	286	2034	23.0	31.0
2	朱馨蕾	新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室	4	43	3.0	4.0
3	马艳		5	91	4.0	5.0