人精子蛋白17放射诱导表达细胞模型的构建

• 作者: 张春华 朱锡旭 李芳秋 杨爱龙 缪家文
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 精子蛋白Sp17 Egr-1启动子 X线 表达 卵巢癌细胞模型
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 454-456
• 页数: 3页
• 分类号: Q78|Q813
• 字数: 2820字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.03.026

摘要

目的:构建pEgr-Sp17重组质粒,并检测其在人卵巢癌细胞系HO8910中的辐射诱导表达,探索Egr-1基因调控序列辐射诱导下游基因表达的功能,建立放射诱导表达人精子蛋白Sp17的细胞模型.方法:用双酶切、粘端连接的方法构建含有辐射诱导特性的早期反应因子Egr-1和人Sp17基因的pEgr-Sp17重组质粒,利用脂质体介导其转染人HO8910细胞,用免疫细胞化学方法检测X线照射后被转染细胞中Sp17的表达.在确证Sp17能瞬时表达后,继续用含G418的RPMI1640培养基培养细胞,筛选稳定表达Sp17的细胞株.结果:测序结果和酶切鉴定均证实pEgr-Sp17重组质粒构建正确;免疫细胞化学试验表明pEgr-Sp17重组质粒转染的人HO8910细胞表达Sp17蛋白.结论:x线可诱导pEgr-Sp17重组质粒在人HO8910细胞中表达Sp17蛋白,构建了Sp17蛋白放射诱导表达的卵巢癌细胞模型.