用免疫细胞化学、RT-PCR等方法定量检测狂犬病毒及其核酸的比较研究

• 作者: 徐葛林 朱家鸿 王继麟 胡巧玲
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 狂犬病毒 定量检测 免疫细胞化学 R-PCR 免疫荧光
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 101-105
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4005字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.02.001

摘要

目的 比较多种定量检测狂犬病毒(RV)及其核酸的方法.方法 采用免疫细胞化学(ICCA)、RT-PCR、间接和直接免疫荧光(FA)以及细胞ELISA(CELISA)等多种方法对感染细胞单层的RV进行定量检测,比较和评价用不同方法检测RV的灵敏度和稳定性.结果 采用ICCA法可在3h内对培养24h的RV进行准确和定量检测,可检测到RV的单个病灶(FFU),其灵敏度和稳定性与FA相当而优于CELISA;用RT-PCR的方法检测RV Mrna具有很高的灵敏度,通过测定RT-PCR产物电泳条带的灰度值,并经GAPDH基因校正,在感染细胞RV的量与其RT-PCR产物间建立了量效关系曲线及曲线方程,其决定系数(R2)达0.96.结论 建立了多种方法对RV进行定量检测,其中用ICCA检测可在不使用荧光显微镜情况下对RV进行定量检测,经济实用,适于基层推广使用;用RT-PCR的方法亦可高灵敏度地检测RV的核酸,并进行定量分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王继麟		13	63	5.0	7.0
2	朱家鸿		17	97	5.0	9.0
3	徐葛林		45	329	9.0	16.0
4	胡巧玲		5	89	4.0	5.0