猪瘟病毒E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点整合载体的构建

• 作者: 张志芳 李轶女 杨宗岐 沈桂芳 王勇
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒E2基因 叶绿体转化 同源重组 定点整合 百脉根
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 2648-2654
• 页数: 7页
• 分类号: S8
• 字数: 5266字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2007.11.035

摘要

[目的]构建猪瘟病毒主要抗原E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点转化载体,为百脉根叶绿体的转化及用叶绿体生产动物可直接食用疫苗奠定基础.[方法]通过用BLAST、DNAMAN等分子生物学分析软件对百脉根叶绿体基因组序列进行分析选定同源重组片段,采用PCR、分子克隆技术进行载体构建和鉴定.[结果]在百脉根叶绿体基因组中选择合适的外源基因整合位点,设计引物用PCR扩增叶绿体同源片段,将同源片段克隆后,构建百脉根特异的叶绿体转化载体;构建的百脉根叶绿体定点转化载体pAKE2以扩增的1.35 kb psbA 和1.5 kb trnK两段相邻叶绿体 DNA为定点整合外源基因的同源重组片段,包含以叶绿体基因特异强启动子Prrn和终止子TpsbA为调控序列的E2基因表达盒和aadA壮观霉素抗性基因表达盒.[结论]经PCR和酶切验证,所构建的转化载体符合预期设计.叶绿体转化及后续工作目前正在进行之中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王勇	南开大学生命科学学院	82	972	19.0	28.0
2	沈桂芳	中国农业科学院生物技术研究所	49	807	17.0	26.0
3	张志芳	中国农业科学院生物技术研究所	76	600	14.0	20.0
4	李轶女	中国农业科学院生物技术研究所	52	364	10.0	17.0
5	杨宗岐	南开大学生命科学学院	4	27	3.0	4.0